Paired domain遺伝子に属するPax-8 mRNAのラット胎盤における検出

Abstract

Pax-8 is a paired domain gene that expresses a transcriptional control factor in the thyroid gland and kidney, and may be associated with indifferentiation of tissues. This study examined whether the Pax-8 present in the rat placenta. Total RNA was extracted from the thyroid gland, liver, kidney and placenta of pregnant rats, and the target mRNA was detected using cDNA that was synthesized on the basis of nucleic acid sequence of Pax-8 and amplified by the RT (Reverse Transcription) Polymerase Chain Reaction (PCR). From electrophoresis of the PCR products, a single band of approximately 820 base pairs was separated in the thyroid gland and kidney samples but not in the liver. This band is possibly a band of Pax-8. Although Pax-8 was detected in the rat placenta RNA, the amount of Pax-8 in the placenta was less than that in the thyroid gland. It has been demonstrated that Pax-8 gene has an important role in regulation of specific protein expression in the thyroid gland. These findings suggest a possibility that Pax-8 is involved in the expression of placental lactogen and chorionic gonadotropin which has homologous nucleic acid sequences to growth hormone and thyroid stimulating hormone.

甲状腺と腎にその存在が確認されている転写調節因子で、組織の分化に関わるとされているpaired domain遺伝子、Pax-8が胎盤組織で発現しているか否かを検討した。その結果、甲状腺、腎の両方のRNAから、RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)法により約820対の単一のバンドが検出された。一方、肝RNAからは、増幅産物は検出されなかった。Pax-8cDNAの塩基配列から予想される増幅産物の大きさは828塩基対であり、検出されたバンドは甲状腺、腎におけるPax-8の発現を示すものと考えられ、この結果は従来の報告と一致した。次に胎盤RNAを用いてPax-8mRNAの検出を試みた結果、甲状腺、腎からの増幅産物と同一の大きさのバンドが胎盤から検出された。また、エチジウムブロマイド染色によるバンドの濃さが各臓器により異なることから、Pax-8の発現量には臓器間で差があることが示された。すなわち、Pax-8の胎盤での発現量は甲状腺に比べ少いことが示された。Pax-8は、マウスの胎児cDNAライブラリーよりクローニングされたpaired domain遺伝子群に属する遺伝子であり、成熟マウスでは甲状腺と腎でのみ発現していることが報告され、DNA結合能を有する転写調節因子であることが判明した。今回、胎盤においてPax-8mRNAが検出されたことから、甲状腺特異的蛋白と同様に、胎盤特異的蛋白である胎盤性ラクトゲン(hPL)や絨毛性ゴナドトロピン(hCG)の遺伝子発現におけるPax-8の関与が示された。