Photosensitive enzyme nitrile hydratase from Rhodococcus sp. N-771

Abstract

Nitrile hydratase (NHase) from bacteria Rhodococcus sp. N-771, which hydrates various nitrile compounds to the corresponding amides, is activated by near-ultra violet light irradiation. Several spectrometric studies revealed that one of the two non-heme iron atoms contained in the NHase is photooxidized upon photoactivation. A crystal of the NHase suitable for X-ray crystallographic analysis was crystallized by the vapor diffusion method. This crystal belongs to an orthorhombic system and the space group is P2(sub 1)2(sub 1)2 with cell dimensions of a = 117.4 A, b = 145.7 A, c = 52.1 A. The intensity data of up to 2.2 A resolution were collected at the Photon Factory in KEK (National Laboratory for High Energy Physics).

種々のニトリル化合物をそれぞれの対応するアミドに水和させるバクテリアRhodoccus属N-771から得たニトリルヒドロリアーゼ(NHアーゼ)を近紫外光で照射して活性化させた。いくつかのスペクトル研究により、NHアーゼ中に含まれる2つの非ヘム鉄原子の1つは光活性化によって光酸化されることが明らかになった。X線結晶解析に適したNHアーゼの結晶を蒸気拡散法により作成した。この結晶は斜方晶系に属するもので、空間群はセル直径α=117.4オングストローム、b=145.7オングストローム、C=52.1オングストロームをもつP21212である。高エネルギー研究所(KEK)の放射光施設を用いて、最高2.2オングストロームの分解能で強度データを収集した。