未熟心筋の虚血再潅流傷害に対するamiloride誘導体(amiloride,5-(N,N-dimethyl)hydrochloride)の保護効果

Abstract

It is known that excess intracellular Ca(2+) causes cytotoxic reaction after reperfusion of cardiac ischemia. Ca(2+) is transported into the cell by Na(+)/Ca(2+) exchange propelled by H(+) concentration gradient, followed by Na(+)/H(+) exchange. It was reported that amiloride improved cardiac function in newborn rabbit hearts where intracellular Na(+) misht be accumulated more than matured hearts probably due to anaerobic glycolysis. This effect depends on inhibition of Na(+)/H(+) and Na(+)/Ca(2+) exchanger. This study concerns protective action of a amiloride derivative, amiloride, 5-(N, N-dimethyl) hydrochloride (DMA) against reperfusion infury after ischemia, which can inhibit Na(+)/H(+) exchanger selectively. In this study, perfusion was blocked for 45 minutes after 15 minutes of preperfusion in isolated newborn rabbit heart, followed by reperfusion for 30 minutes, and Left Ventricular Developed Pressure (LVDP) was measured, as well as the amount of CPK (Creatine Phosphokinase) in perfusate for 15 minutes after the reperfusion was determined. It was also revealed that DMA barely effected non-ischemic heart from one to 10 micromoles, but 100 micromoles of DMA caused cardiac arrest. LVDP recovery rate was 51 percent in control group, whereas DMA improved it up to 91 percent. Comparing the amount of CPK, DMA group was decreased significantly than control group (68 unit/g vs. 10 unit/g). These results suggest that DMA improved LVDP recovery rate after reperfusion, and decreased CPK release, without any adverse effect on the heart. This effect was as much strong as amiloride.

アミロライドに比べてより選択的にNa(+)/H(+)交換を阻害するアミロライド誘導体塩酸塩(DMA)を、虚血前の新生家兎潅流心に添加したときの保護効果を検討した。生後3日から6日の新生家兎から摘出した心臓の左室内へ経左房的にラテックスバルーンを挿入し、左室等容収縮により発生する圧(LVDP)とその1次微分を計測した。バルーン内の容積は、拡張期圧が5mmHgとなるように調節した。15分間のランゲンドルフ潅流にて状態を安定させたのち、潅流液中にDMAを30分間添加し、非虚血状態の心臓に対する単独作用を観察した。虚血終了後30分間再潅流し、再潅流開始直後から15分間の心潅流液を採取し、その中に遊出したCPK総量を計測した。統計学的検定には1元分散分析法を用いた。その結果、DMA1μM添加では左室機能および心拍数に有意な変化は生じなかった。DMA10μM添加後、左室の収縮、拡張機能がやや低下し、洗浄で回復した。DMA100μM添加後は心拍動が停止し、洗浄後は心機能の部分的な回復が認められた。これにより新生家兎の非虚血下心機能に対してほとんど影響を与えないか、あるいはごくわずかな抑制作用を示す濃度のDMAを虚血前に与えておくと再潅流後の左室機能回復率が改善され、CPK遊出が減少することが明らかとなった。また新生家兎心臓の虚血再潅流傷害に対するDMAの保護作用の力価がアミロライドより強いことは、Na(+)/H(+)交換抑制作用の力価の差で説明できるように思われる