Detection of molecular ions of non-covalent complexes of Ras-GDP and Ras-GppNp by MALDI-TOF mass spectrometry

Abstract

Detection of non-covalent complexes of Ras-GDP (Guanosine Diphosphate) and Ras-GppNp (guanosine-5'(beta, gamma-imido)-triphosphate; GTP analogue) using Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOFMS) is reported. Ras proteins bind GDP or GppNp, non-covalently, with ionic bonds. The GDP-bound Ras is inactive, while the GTP-bound Ras is active. This paper shows the possibility of detecting the active and inactive forms of a regulatory protein, which is non-covalently bound with a nucleotide, with a small sample amount by MALDI-TOFMS analyses.

Ras・GDPとRas・GppNp(グアノシン-5'-(β,γ-イミド)-3りん酸:GTP類似体)の非共有結合性錯体のマトリックス支援レーザ脱離イオン化飛行時間質量分析法(MALDI-TOFMS)による検出を報告した。Ras蛋白質はGDPまたはGppNpとイオン結合により非共有結合的に結合している。GDP結合蛋白質は活性であり、GTP結合蛋白質は不活性である。ここではヌクレオチドと非共有結合的に結合する制御蛋白質の活性および不活性形の検出が少量の試料でMALDI-TOF質量分析によって可能であることを示した。